分光光度计所采用的分光光度法在定量分析领域中的应用已有数十年的历史,至今仍是实验室中常用的分析方法之一。随着现代科学仪器的不断发展,在传统的追求准确、快速、可靠的同时,小型化、智能化、在线化、网络化成为了现代可见分光光度计新的增长点。
结构组成
分光光度计的基本组成和大多数分光光度计一样,都是由光源、单色器、比色池、光电检测器和放大器几部分组成。
1.光源
分光光度计的可见区的光源仍是采用卤素钨灯和氘灯。卤素钨灯的工作波长范围为:320～2500nm,氘灯的工作波长范围为180～375nm。两光源有仪器上的一个灯选择反射镜自动进行选择和光源切换。
1.2单色器(分光系统)
单色器是分光光度计的重要部分,比滤光片选择波长能更有效地提供带宽窄的单色光。是采用先进的光栅单色器,由入射狭缝、出口狭缝、色散元件、准直镜等光学元件组成。入射狭缝是用来调节入射单色光的纯度和强度，也直接影响分辨率。而准直镜(反射凹面镜)的作用一是将入射光束变为平行光束后再进入色散元件，二是把来自色散元件的平行光束聚焦于出口狭缝上,形成光谱像。出口狭缝是单色光的出口，它只让光谱带中所需要波长的光从狭缝中透出，而将其他波长的光挡住,不让其通过。
色散元件是单色器中的核心元件，起着将复合光分解为单色光的作用。分光光度计的色散元件是凹面反射式全息光栅,它本身就起着分解复合光和准直镜(聚焦)的作用,而且全息光栅具有杂散光小、不产生伪线和分辨率高的优点。
1.3比色池
分光光度计配有多种规格样品池架和比色杯。池架有标准池架、七位池架、50霯微量池架和多形态样品池架。比色杯有常量(2～4mL)、半微量(0.5～1mL)和微量(50～100霯),使用方便。另外还配有样品架卡套,分为特为酶动力学设计的半导体温控池:温度范围15～50℃,和流动池。
正确使用分光光度计
分光光度计操作简便。
打开仪器电源开关，仪器应顺利通过自检，然后预热10分钟左右，可以进行测定。读数时应记录显示的数值，不要让样品连续光照时间太长(动力学测定除外)，特别是在紫外区域测定时更要快速，因为随着光的连续照射读数会下降，变得不稳定。而应用显色剂显色后会使读数稳定，给测定带来方便，同时还会使物质中许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到数十万，明显提高了检测灵敏度。
作为一种分子吸收光谱仪,广泛应用于化学研究、生物医药、环境科学和食品分析等研究领域。它具有分析精度高、应用范围广、分析简便快速和仪器灵敏度较高的优点,是目前大多数实验室常用的定量分析仪器。
