酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。
图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图。
光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本。
该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，由显示器和打印机显示结果.。
微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程。而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单。
步，酶标仪后部的电源开关打开，仪器将显示自检，基础酶联，软件版本号
第二步，等待数秒后，荧屏显示“基础酶联，准备和时间”,工作人员心须详细阅读仪器操作使用说明书,将被测样品板放入酶标盘中，同时打开与酶标仪相连的打印机开关
第三步，“测量模式”键：进入选择波长程序,屏幕显示":基础酶联",""1单长波检测"",通过上下键选择单长波和双长波检测
第四步，按开始开始键,启动阅读功能,酶标仪开始对样品板进行检测
第五步，读数完毕,打印机开始打印结果
